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        小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒

        小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒

        簡要描述:
        小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒用于測定小鼠血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中 C-反應蛋白(CRP)的含量。

        更新時間:2021-09-18

        訪問量:585

        廠商性質:代理商

        生產地址:中國

        <strong>小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒</strong>

        小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒

        一、產品說明

        貨號:MM-0074M1、MM-0074M2

        規格:96T、48T

        試劑盒性能:

        1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數 R 值為 0.95 以上。

        2.批內變異系數與批間變異系數應分別小于 10%和 10% 。

        檢測范圍:

        7.5 ng/mL - 240 ng/mL

        靈敏度:

        最小低檢測濃度小于 1.0 ng/mL

        保存條件及有效期:

        1.試劑盒保存: 2-8℃。

        2.有效期: 6 個月


        二、實驗原理:

        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠 C-反應蛋白(CRP)水平。用純化的小鼠 C-反應蛋白(CRP)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠 C-反應蛋白(CRP),再與 HRP 標記的檢測抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經 過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠 C-反應蛋白(CRP)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中小鼠 C-反應蛋白(CRP)含量。


        三、小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒組成:


        <strong>小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒</strong>

        注:標準品濃度依次為:240、120、60、30、15、0 ng/mL.


        四、樣本處理及要求:

        1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收 集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

        2. 血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次 離心。

        3. 尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過 程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

        4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液, 細胞濃度達到 100 萬/ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離 心。

        5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

        6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

        7. 不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


        五、操作步驟

        1. 標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL;。

        2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

        3. 加酶:每孔加入酶標試劑 100μl,空白孔除外。

        4. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 60 分鐘。

        5. 配液:將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。

        6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。

        7. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 15 分鐘.

        8. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

        9. 測定:以空白孔調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。


        六、注意事項:

        1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

        2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

        3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

        4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔第一孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

        5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

        6. 底物請避光保存。

        7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

        8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

        9. 本試劑不同批號組分不得混用。

        10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。


        溫馨提示:

        本產品提供代測服務,凡購買本公司ELISA試劑盒的客戶,均可享受免費的ELISA代測服務。詳情可詢我司在線客服和經理!



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