U937細胞高效率轉染試劑高效率轉染條件分享
一、轉染材料準備
1. 轉染試劑用量：10ul
2. DNA/siRNA濃度：電訊
3. 細胞密度：1*106-1*105
4. 轉染用培養板：6孔板
5. 轉染試劑：zeta life ,Advanced DNA RNA轉染試劑；
6. 轉染時間：15小時
7. 細胞培養胎牛血清：Z7181FBS-500胎牛血清
8. 細胞凍存液：L0100無血清細胞凍存液
注意：本細胞轉染用量條件不適合lipo使用。
二、操作過程：
1.提前1天接種細胞：細胞匯合度在60-80%左右，再進行轉染。
2. 核酸復合物制備：將核酸與轉染試劑按照比例關系直接混合，用移液器吹打、混勻，室溫靜止15分鐘。
3.在細胞培養基中加入核酸復合物：根據參考用量在細胞中加入核酸復合物，并輕輕混勻；細胞培養基里面可以含有血清。
4.細胞換液：轉染24小時后對細胞進行正常換液，懸浮細胞轉染過程中不用換液。
5.分析結果：質粒DNA轉染48-72小時后熒光檢測轉染效率，48-96小時檢測mRNA或蛋白表達。若進行穩定表達細胞株的篩選，則在轉染后24-48小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA轉染后9小時熒光檢測轉染效率，48-72小時檢測mRNA或蛋白表達。
U937細胞高效率轉染試劑貨號規格：
品牌：美國Zeta Life 貨號：AD600025 0.25ml
品牌：美國Zeta Life 貨號：AD600050 0.5ml
品牌：美國Zeta Life 貨號：AD600075 0.75ml
品牌：美國Zeta Life 貨號：AD600150 1.5ml
品牌：美國Zeta Life 貨號：AD600500 5ml
品牌：美國Zeta Life 貨號：AD601000 10ml
